ELISA试剂盒试验中常会遇到这些疑问：
1. 温育条件纷歧致，上海恒远建议：恒温箱温育较水浴显色深，OD值高出0.1-0.15，均选用恒温箱。如用水浴水温应控制在37℃。
2. 样品数量纷歧，加样时刻长短纷歧。当重复某相同品时，加样时刻尽可能与接近。
考虑到有些客户没有试验设备，我公司还能够供给代测效劳，只需付试剂盒的费用，代测是免费的哦！
间接法 ：此测定方法与直接法类似，纷歧样在于一级抗体没有酶符号，改用酶符号的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
双抗体夹心法 ：被检查的抗原包被在两个抗体之间，其间一个抗体将抗原固定于固相载体上，即捕捉抗体。
ELISA试剂盒另一个则是检查抗体，此抗体可用酶符号后直接测定抗原的量；或不符号，再透过酶符号的二级抗体来测定抗原的量。
这两种抗体有必要当心挑选，才可防止交互反应或竞赛相同的抗原联络部位。
竞赛法：样本里的抗原（安闲抗原）和纯化并固定在固相载体上的抗原（固定抗原）一同竞赛相同的抗体，当样品里的安闲抗原越多，就能够联络越多的抗体，而固定抗原就只能联络到较少的抗体，反之亦然。
经清洗进程，洗去安闲抗原和抗体的复合物，只留下固定抗原和抗体的复合物，拿来与只需固定抗原的对照组效果相比较，根据呈色差异就可计算出样品里的抗原含量。
ELISA试剂盒直接法 ：将抗原直接固定在固相载体上，参加酶符号的一级抗体，即可测定抗原总量，此一级抗体的特异性非常重要。
