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在做ELISA试剂盒实验的时候不需要做热处理这一步

阅读:334发布时间:2014-12-24

实验ELISA试剂盒血清显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或*没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是 "小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,ELISA试剂盒而把血清放在37C环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。 
因此我们建议您,若非必须,如此一来,不但节省您宝贵的时间,更确保您血清的质量!另外,购买已灭活成品也不失一个捷径,请在购买ELISA试剂盒的时候注意询问厂家是否是已灭活ELISA试剂盒血清。 1、解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2O。C至4。C至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20。C至37。C),实验显示非常容易产生沉淀物。 
2、解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生 
3、请勿将血清置于37。C太久。若在37。C放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。 
4、ELISA试剂盒血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。 
5、若必须做血清的热灭活,请遵守56。C,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理? 欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。 
何谓热灭活?
一般是以56C,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热ELISA试剂盒步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。 


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