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ELISA实验通用规则十八条

阅读:161发布时间:2016-11-24

1)ELISA试剂盒要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有专业人员进行矫正。
2)要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
3)要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
4)实验时,要使底物避光保存。
5)用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
6)吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
7)将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
8)液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
9)ELISA试剂盒温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
10)洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
11)洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
12)底物是光敏感的,要在临用前现配。
13)检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
14)底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
15)待检样品要澄清,否则会影响结果。
16)温浴时间应遵守试剂盒规定。
17)应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。
18)ELISA试剂盒对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。


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