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ELISA的技能点我们了解多少

阅读:243发布时间:2017-4-21

                    ELISA的技能点我们了解多少

为了得到非常好的试验成果,一些ELISA试剂盒试验新手们还需多加了解技能内容,公司每周都会为您精心整理出重点技能方法,可以娴熟的掌握好这些以后再应用到试验里面就会简略的多。今天的主要内容ELISA试剂盒的一些技能关键:
样本加样方法
1、细胞上清:前处理有必要是细胞离心去掉,每孔直接加100μl即可。假如浓度太高需稀释时,用规范品稀释液直接稀释。
2、脑脊液:前处理有必要是细胞离心去掉,每孔直接加100μl即可。假如浓度太高需稀释时,用规范品稀释液直接稀释。
3、血清血浆:请参加50ul样本剖析缓冲液后加50ul标本,如稀释量大,请将样本与样本剖析缓冲液等量参加,缺乏部分用规范品稀释液弥补至100ul。
4、安排匀浆液的样本,要制备过程中需要在缓冲液中参加蛋白酶按捺剂,防止蛋白成份被内源性蛋白酶降解,形成检查成果的值偏低。


A.血清标本应是自然凝结后,取上清,防止在冰箱中凝结血液;
B.血浆标本,引荐用EDTA的方法搜集若待测样本不能及时检查,标本搜集后请分装,冻存于-20℃,防止反复冻融。
c.血清标本不该增加任何防腐剂或抗凝剂;
D.标本应明澈通明,检查前样本中如有悬浮物应经过离心去掉。
E.请勿运用溶血,高血脂或污染的标本检查,不然成果将不。


因安排匀浆液的样本蛋白品种多,含量丰厚,试验参照血清血浆标本的处理方法进行,不然就会影响试验成果。详细是参加50ul样本剖析缓冲液后加50ul标本,需稀释时,请将样本与样本剖析缓冲液等量参加,缺乏部分用规范品稀释液弥补至100ul。


因为方针蛋白不一样,也许形成降解的蛋白类型也许不一样,假如试验前经过文献断定用哪种蛋白酶按捺剂,有针对性参加,可节约按捺剂。假如查不到有关文献,可采用组合按捺的方法保证蛋白不易被降解。


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