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阅读:250发布时间:2017-4-27
ELISA试剂盒在收集标本前都必须有一个完好的计划,必须理解要查看的成份是不是满足安稳。新鲜标本应尽早查看,对收集后当天就进行查看的标本,应及时储存在4℃备用。如因格外因素需要守时、多次收集标本,请选材后,将标本及时分装后放在-20℃或以下条件下保存。由于蛋白样品多不安稳,很简单降解,应防止重复冻融,以削减对实验的影响。今日我们和我们同享ELISA实验中样本的收集方法:
一、液体类标本,液体类标本包含血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
血清:室温血液天然凝聚10-20分钟后,离心20分钟支配(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有堆积构成,应再次离心。
血浆:应根据标本的请求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟支配(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有堆积构成,应再次离心。
尿液:用无菌管收集。离心20分钟支配(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有堆积构成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此施行。
细胞培养上清:查看排泄性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟支配(2000-3000转/分)。仔细收集上清。查看细胞内的成份时,用PBS(pH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度到达100万/ml支配。通过重复冻融,以使细胞损坏并放出细胞内成份。离心20分钟支配(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有堆积构成,应再次离心。
二、组织标本:收集标本后,称取组织毛重,用液氮灵敏冷冻保存备用。标本融化后要保存在2-8℃的温度,参与一定量的PBS(pH7.2-7.4),用手工或电动匀浆器将标本充沛匀浆。4℃离心(10000-15000转/分)10-20分钟。收集上清,留取恰当查看,其他冷冻保存备用。
备注:假设样本中的待检物需要提纯,请客户自行处理。
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