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ELISA试剂盒操作程序

阅读:225发布时间:2017-8-4

ELISA试剂盒操作程序
1. 分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准品孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品孔中加入标准品50μl;在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。轻轻晃动混匀,37℃温育60分钟。
2. 弃去液体,甩干,每孔加满稀释后洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。如此重复5次,拍干。
3. 每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
4. 取出酶标板,每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
5. 测定:以空白孔调零,在450nm波长下测量各孔的吸光度值(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
6. 根据elisa试剂盒免费代测标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了的,其实际浓度应该乘以总稀释倍数。
ELISA试剂盒公司专业提供有细胞株和菌株、胎牛血清、标准品和对照品、生化试剂、ELISA试剂盒、抗体和抗原、培养基等产品,经过多年的努力与发展,已具一定的规模及实力,拥有丰富的服务经验和深厚专业的背景团队,为您提供技术服务和支持。


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