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人ELISA试剂盒样本处理及要求

时间:2015-11-23阅读:273
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在使用人ELISA试剂盒时,能够正确的处理样本,并能注意一些小细节,在检测过程中就能避免很多不必要的麻烦,让你的整个检测过程更快、更准、更容易。

1.  血浆:应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离心20 分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

2.  血清:室温血液自然凝固 10-20 分钟,离心 20分钟左右(2000-3000 /分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

 3.  尿液:用无菌管收集,离心 20 分钟左右(2000-3000 /分) 。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4.  细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右(2000-3000 /分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBSPH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到 100 /ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5.  组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBSPH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持 2-8℃的温度。加入一定量的 PBSPH7.4 ,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右(2000-3000/分) 。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

ELISA试剂盒样本要求,标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融;不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

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