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基质金属蛋白酶MMP2/MMP9明胶酶谱电泳检测试剂盒的使用注意事项

时间:2018/7/12阅读:2415
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基质金属蛋白酶MMP2/MMP9明胶酶谱电泳检测试剂盒的使用注意事项

MMP检测注意事项:细胞培养基要用无血清培养基;样本裂解时不含EDTA,明胶酶谱的活性受钙离子,锌离子,和PH值等因素的影响,因此缓冲液 配制应严格准确,尽量用超纯水,孵育温度也掌握好。因为检测蛋白活性,所以应尽量避免蛋白变性,一般都要求冰上操作,电泳也放在冰水里进行的。

注意事项说明:

1.制备聚丙烯酰胺时应注意排除气泡。

2.明胶酶谱的活性受钙离子,锌离子,和PH值等因素的影响,因此缓冲液配制应严格准确,尽量用超纯水,孵育温度也掌握好。

3.用大梳子。

4.孵育液的PH在7.5-7.6,复性的TRITON时间长了会有絮状物,所以实验时尽量使用新鲜配置的。

5.孵育的37度不要在CO2培养箱中,因为会改变孵育液的PH值,在普通孵箱即可。

6.明胶要4度保存,配好后1周内使用。

7.样本活性低可以延长孵育时间到48小时

基质金属蛋白酶MMP2/MMP9明胶酶谱电泳检测试剂盒的使用注意事项

 

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