信帆生物
中级会员 | 第11年

13764793648

当前位置:首页   >>   资料下载   >>   男女呻吟久久免费视频 丙酮酸检测试剂盒说明书下载

男女呻吟久久免费视频 丙酮酸检测试剂盒说明书下载

时间:2015-9-22阅读:1417
分享:
  • 提供商

    信帆生物
  • 资料大小

    2.9KB
  • 资料图片

  • 下载次数

    72次
  • 资料类型

    PNG 图片
  • 浏览次数

    1417次
点击免费下载该资料

丙酮酸(pyruvic  acid PA)检测试剂盒说明书下载

测定意义:

丙酮酸通过乙酰 CoA 连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢,起着重要的枢纽作用。

测定原理:

丙酮酸与 2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在碱性溶液中呈樱红色。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存; 试剂一:液体 5mL×1 瓶, 4℃保存; 试剂二:液体 25mL×1 瓶, 4℃保存。 丙酮酸提取:

1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量

104 个):提取液体积(mL)为 500~10001 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提 取液),超声波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),静置 30min8000g,常温离心 10min,取上清待测。

2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织, 加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆,静置 30min8000g,常温离心 10min,取上清待测。 3、血清(浆)样品:按照血清(浆)体积(mL):提取液体积(mL)15~10 的比例(建 议取 0.1mL 血清(浆)加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆,静置 30min8000g,常温离心 10min,取上清待测。

测定步骤:

1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 520nm,蒸馏水调零。

2、取 300μL 样本+100μL 试剂一于 1.5mL EP 管中,混匀,静置 2min,加入 500μL 试剂二, 混匀,于 520nm 波长处测定管吸光值 A

丙酮酸含量计算:

1、标准条件下测定回归方程为 y = 0.0466x + 0.0675x 为丙酮酸钠含量(μg/mL),y 为吸 光值。

2、按照血清(浆)体积计算

丙酮酸含量(μg/mL= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷V3×V1÷V2=214.6×(A-0.0675)

3、按照蛋白浓度计算

丙酮酸含量(μg/mg prot=[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(V1×Cpr)=21.46×(A-0.0675) ÷Cpr

4、按照样品质量计算

丙酮酸含量(μg/g 鲜重)= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(W ×V1÷V2=21.46×(A-0.0675) ÷W

3、按照细菌或细胞密度计算

丙酮酸含量(μg/104 cell)=[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷500×V1÷V2=0.043×(A-0.0675)

V1:加入反应体系中样本体积,0.3mLV2:加入提取液体积,1 mLV3:加入血清(浆) 体积,0.1 mLCpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样本质量,g500:细菌或细胞总数, 500 万。


会员登录

×

请输入账号

请输入密码

=

请输验证码

收藏该商铺

X
该信息已收藏!
标签:
保存成功

(空格分隔,最多3个,单个标签最多10个字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我们将在第一时间回复您~
拨打电话
在线留言