一、ELISA试剂盒实验中血清的采集、处理和保存;
1、 真空*采集2ml新鲜血液,加入无菌试管中;
2、 采血后室温静置1小时;
3、 将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心10min,,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。
4、 取上清。 分装冻存备用, 2-8℃下,可放置保存24-48小时; -20℃下,可放置保存1个月; -70℃下,可放置保存6个月;
5、 根据你的实验需要,取适量上清夜进行各种ELISA测定。
大部分、ELISA试剂盒检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的 ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。此外还应避免细菌污染,因为菌体中可能含有含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。血清标本宜在新鲜 时检测。如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。
二、、ELISA试剂盒实验中血浆的采集、处理和保存;
1、 真空*采集2ml新鲜血液,加入无菌试管中;
2、 按1:9加入抗凝剂(EDTA、草酸钠、肝素、*),30分钟内于冰上分离血浆以 减少血小板的污染;(也可以直接用抗凝管采集);
3、 将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心5min,,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。 4、 取上清。 分装冻存备用, 2-8℃下,可放置保存24-48小时; -20℃下,可放置保存1个月;
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