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常用的免疫酶染色方法

时间:2015-7-15阅读:369
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?  又分为以下两种方法:
–  酶标抗体
?  直接法
?  间接法
–  非标记抗体酶法
?  酶桥法
?  PAP法

(1) 酶标抗体法
?  通过共价键将酶结合在抗体上,制成酶标抗体,与标本进行反应后,再用酶组化法将酶显色,使之生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,以供光镜和电镜观察。
–  优点:切片能长期保存、反复观察,适于镜下半定量分析。
–  缺点:酶与抗体形成的共价键,可损害抗体和酶的活性;易产生非特异染色。

(2) 酶标抗体法——直接法
? 将酶直接标记在一抗上,然后直接与相应抗原特异地结合。形成抗原-抗体-酶复合物,zui后用底物显色剂显色。

(3) 酶标抗体法——间接法
?  将酶标记在二抗上,先将一抗与相应的抗原结合,形成抗原抗体复合物,再用二抗(酶标抗体)与复合物中的特异抗体结合,形成抗原-抗体-酶标抗体复合物,zui后用底物显色剂显色。
酶标抗体间接法的操作步骤
?  标本准备:
–  石蜡脱蜡至水;
–  冰冻切片浸入4?C丙酮固定10min,0.01M PBST漂洗,5min×3;
–  细胞爬片先用PBS洗,然后4?C丙酮固定10min,再0.01M PBST漂洗,5min×3;
?  石蜡切片需要进行抗原修复,其它标本则不用;

英文名称 Homo sapiens (Human) 钙黏蛋白10(CDH10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格: 48T/96T
英文名称 Homo sapiens (Human) 钙磷蛋白2(CAPS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格: 48T/96T
英文名称 Homo sapiens (Human) 钙磷蛋白(CAPS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格: 48T/96T
英文名称 Homo sapiens (Human) 钙联接蛋白(CLGN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格: 48T/96T
英文名称 Homo sapiens (Human) 钙联蛋白(CNX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格: 48T/96T
英文名称 Mus musculus (Mouse) 钙离子转运ATP酶B2(ATP2B2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格: 48T/96T
抗体英文名称 Homo sapiens (Human) 钙离子转运ATP酶A2(ATP2A2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格: 48T/96T
英文名称 Mus musculus (Mouse) 钙离子转运ATP酶A2(ATP2A2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格: 48T/96T
英文名称 Homo sapiens (Human) 钙结合蛋白3(CALB3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格: 48T/96T

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