在植物病理学研究工作中经常要使用各种不同的培养基。培养基是按照生物生长繁殖所需要的各种营养，用人工方法配制而成的营养基质。其中含有碳源、氮源、无机盐、维生素以及水分等。微生物在培养基上生长繁殖还必须在zui适pH范围内才能生长得更好，因此，对不同种类的微生物应将培养基调节到一定的pH范围。
培养基的种类很多，不同的微生物所需要的培养基不同。依物理性状可分为液体的、固体的和半固体的三种。固体培养基是在液体培养基中加入1．5％--2％的琼脂，半固体培养基是加入0．2％～0．5％的琼脂。琼脂又称琼胶或洋菜，是由海藻加工而成，其化学性质稳定一般微生物均不能分解利用。它在95℃热水中溶化成溶胶，冷却到45℃以下时又重新凝固，故一般实验中常用它作为凝固剂。
根据营养物质来源的不同，培养基可分为天然、半合成和合成培养基三类。天然培养基是以自然界原有的有机物为材料经灭菌后制成，如马钤薯、胡 萝卜水果、大麦粒、高粱粒等。半合成培养基中既有一些天然的有机物质，又有一些成分简单或明确的化合物。如常用的马铃薯葡萄糖培养基(PDA)、肉汁胨培养基(NA)等。合成培养基是由一些成分明确的化合物配制而成的，无任何成分不明确的物质，常用于研究微生物的生理生化性状，如查氏(Czapek)培养基等。
根据培养基用途不同，可分为生长繁殖培养基、富集培养基、贮存培养基、选择性培养基和鉴别培养基等。在植物病理学研究中，zui常用培养基有马铃薯葡萄糖培养基，主要用于分离培养病原真菌。
在培养基配制完之后，必须经过灭菌，以便*杀死其中原有的一切微生物。
三、材料、试剂与仪器
1．材料马铃薯。
2．试剂 葡萄糖、琼脂等。
3．仪器与用品 高压蒸汽灭菌锅、pH试纸(或酸度计)、试管、铝锅、搅拌棒、三角瓶、烧杯、漏斗、量筒、纱布、棉花、天平等。
四、操作步骤
PDA培养基(马铃薯葡萄糖培养基)配方：去皮马铃薯200g 葡萄糖20g琼脂15—20g蒸馏水1000ml 自然pH。在PDA培养基配方中也可用蔗糖代替葡萄糖，这样配制的培养基也称为PSA培养基。
(1)称量。称量去皮马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15--20g。提示：琼脂加入的量取决于琼脂的质量，质量好的15g就够了，质量差的
应适当增加。另外，在夏天气温较高时，适当增加用量。
(2)将马铃薯切成小块，放入锅中，加水1000ml，煮沸30min。用纱布滤去马铃薯残渣。
3)将马铃薯滤液放回锅中，加入琼脂，加热熔化。
提示：在琼脂熔化的过程中，需要用玻璃棒不断搅拌，并控制火力不要使培养基溢出或烧焦。
(4)加入葡萄糖。葡萄糖溶解后，加入适量的水以补充加热过程中损失的水分，定容至1000ml。
提示：通常在制作培养基的锅内用红蓝铅笔标记出不同体积的刻度，如1000ml、2000ml等，在定容时直接将水加至已标记的刻度即可。
(5)分装。根据不同的实验目的，可将配制的培养基分装于试管内或三角瓶内。分装试管，其量为管高的1／5，灭菌后制成斜面。分装三角瓶的容量以不超过三角瓶容积之一半为宜。
(6)加塞。在管口或瓶口塞上棉塞。棉塞要用未脱脂的经弹松的棉花，棉塞可过滤空气，防止杂菌侵入并可减缓培养基水分的蒸发，故在植物病理学研究工作中普遍使用。
正确的棉塞是形状、大小、松紧与管口或瓶口*适合，过紧时妨碍空气流通，操作不便；过松则达不到滤菌的目的，且棉塞过小往往容易掉进试管内。正确的棉塞头较大，约有1／3在外，2／3在试管内。分装过程中注意不要使培养基沾染在管(瓶)口上以免浸湿棉塞，引起污染。如不使用棉塞也可用橡皮塞或特制的金属、塑料试管帽，为让空气可以自由进出，橡皮塞不要过紧，灭菌前应夹一纱线在管口。
(7)包扎。加塞后，将试管用线绳捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳扎好。用记号笔注明培养基名称、配制日期、组别、制作人等。
(8)灭菌。将上述培养基以0．103MPa，121C，高压蒸气灭菌20min。
(9)搁置斜面。将灭菌的试管培养基冷至5013左右(以防斜面上冷凝水太多)，将试管口端搁在玻棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。
培养基经灭菌后，必须放在37C温箱培养24h，无菌生长者方可使用。PDA培养基一般不需要调pH。对于要调节pH的培养基，一般用pH试
纸测定其pH。如果培养基偏酸或偏碱时，可用lmol／LNaOH或lmol／LHCL溶液进行调节。调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。
提示：pH不要调过头，以避免回调而影响培养基内各离子的浓度。配制低pH的琼脂培养基时，若预先调好pH并在高压蒸汽下灭菌，则琼脂因水解不能凝固。因此，应将培养基的成分和琼脂分开灭菌后再混合，或在中性pH条件下灭菌，再调整pH。
