人疱疹病毒 8 型 PCR 试剂盒说明书
【产品名称】
商品名称：人疱疹病毒 8 型 PCR 试剂盒
Name ：Human Herpesvirus-8 (HHV-8) PCR Kit
【包装规格】50 次/盒
【产品及特点】
人疱疹病毒 8 型(Human Herpesvirus-8,HHV-8)是从淋巴增生性疾
病和艾滋病患者淋巴细胞中培养获得的一种新病毒，可通过唾液飞沫及密
切接触（如接吻，共用餐、饮器具等）、输血传播。除免疫低
下（如先天性免疫缺陷、艾滋病、长期服用免疫抑制剂等）外，绝大多数
人感染后终身都不会产生明显症状；免疫低下者，如 HIV 感染者，当人
体特异性免疫被削弱至一定程度时， 潜伏的病毒可被激活并产生急性感
染症状，此时会出现间质性肺炎、脑炎、脑膜炎、肝炎及多器官衰竭等症
状，活化的病毒可大规模感染 T 淋巴细胞，使免疫功能进一步削弱，该
病毒对人体健康有较大影响，因此检测人疱疹病毒 8型 DNA 具有重要意
义。本产品就是根据 PCR 原理开发的、检测此病毒的试剂盒。本产品具
有下列特点：
1.即开即用，用户只需要提供病毒 DNA 模板。
2.引物经过精心优化，专一性强，只扩增人疱疹病毒8 型病毒 DNA，与
其他病毒没有交叉反应。
3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4.PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5.本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
【规格及成分】
成 份 编号 十孔盒包装
PCR MagicMix 3.0 63981 1 mL（红盖）
超纯水 109350 1 mL（亮黄色）
人疱疹病毒 8型 PCR 引物混合液 3026yw 100 μL（白盖）
人疱疹病毒 8 型 PCR 阳性对照
（1×10E8 拷贝/μL）
93981-3026pc 50 μL（黄盖）
【运输及保存】
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。人疱疹病毒 8 型 PCR 阳性对
照需要单独放置，不要污染其他试剂。
【自备试剂】
样品 DNA。
【使用方法】
一、样品 DNA 的制备
用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA
提取试剂盒兼容。
2.如果有 N 个样品，则需做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和
一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是人疱疹病毒8 型 PCR 阳性
对照的 1000 倍稀释液，其总体积等于试剂盒所需的样品量，样品制备阴
性对照是直接用水。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3.对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴
性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成
分：
成分
N+2 个
样品管
PCR 阴性
对照
PCR 阳性
对照
PCR Magic Mix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL
人疱疹病毒 8 型通用 PCR 引物混
合液
各 2 μL 2 μL 2 μL
N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL - -
PCR 阴性对照（水） - 18 μL -
PCR 阳性对照（人疱疹病毒 6 型通
用 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释
液）
- - 18 μL
4.按下表设置 PCR 反应: 过程 温度 时间
预变性 95℃ 5 min
PCR 反应
（35 个循环）
95℃ 15 sec
55℃ 15 sec
82℃ 30 sec 最后延伸 82℃ 10 min 三、电泳检测
5.取 5μL PCR 产物电泳进行检测。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束
后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR 产物长
度为 481bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否
则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增
以排除 PCR 抑制剂的感染。
