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大鼠胰高血糖素（GC）酶联免疫分析试剂盒操作步骤
2011-6-22 阅读(1180)
 提 供 商 |
上海劲马实验设备有限公司 |  资料大小 |
32KB |
|---|---|---|---|
 资料类型 |
WORD 文档 |  资料图片 |
|
 下载次数 |
56次 |  浏览次数 |
1180次 |
使用目的： 大鼠胰高血糖素（GC）酶联免疫分析试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中胰高血糖素（GC）含量。
操作步骤
1. 标准品的稀释：大鼠胰高血糖素（GC）酶联免疫分析试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
| 80pg/ml | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 40pg/ml | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 20pg/ml | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 10pg/ml | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 5pg/ml | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
