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人粒细胞集落刺激因子elisa试剂盒实验原理

时间:2013/12/25阅读:271
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实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)水平。用纯化的人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入粒细胞集落刺激因子(G-CSF),再与HRP 标记的粒细胞集落刺激因子(G-CSF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB 显色。TMB HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的粒细胞集落刺激因子(G-CSF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)浓度。

试剂盒组成

1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 7 终止液6ml×1

2 酶标试剂6ml×1 8 标准品(1200ng/L0.5ml×1

3 酶标包被板12 孔×8 9 标准品稀释液1.5ml×1

4 样品稀释液6ml×1 10 说明书1

5 显色剂A 6ml×1 11 封板膜2

6 显色剂B 6ml×1/12 密封袋1

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

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