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兔子乙醛脱氢酶(ALDH)ELISA试剂盒使用步骤

时间:2014/7/2阅读:305
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使用目的:

本试剂盒用于测定兔子血清、血浆及相关液体样本中乙醛脱氢酶(ALDH)含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔子乙醛脱氢酶(ALDH)水平。用纯化的兔子乙醛脱氢酶(ALDH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入乙醛脱氢酶(ALDH),再与HRP 标记的乙醛脱氢酶(ALDH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的乙醛脱氢酶(ALDH)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中兔子乙醛脱氢酶(ALDH)浓度。

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

24ng/ml 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液

12ng/ml 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液

6.0ng/ml 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液

3.0ng/ml 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液

1.5ng/ml 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液

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