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本周主题讨论在elisa实验之前需要做好哪些准备工作

时间:2014-7-28阅读:515
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 实验的过程需要注意,但是前期的准备更是马虎不得。有位客户因为准备问题的不*了解而来电给了我公司王,我们很快解决了问题,考虑到一定还有其他朋友想要了解,王要将此发布出来分享给热爱elisa实验的朋友们。
    1、不管是试剂盒,还是其它产品,在使用之前我们都要仔细阅读说明书。
    2、同样的,一定要确定试剂盒是不是在有效期内。
    3、按说明书确定所有试剂齐全(数量、体积)
    4、标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存),尽量分装做备份。短期内无法实验者,注意低温保存。
5、准备好所有实验额外所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等。
    6、根据检测标本数量确定所需试剂的量。
    7、按说明书将所用试剂平衡至室温,配制所需试剂,DIY夹心法ELISA常见技术指南。
    8、选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对;若选择两个单抗,必须识别不同表位的抗体;从同一家公司选择抗体对。
    9ELISA实验中为了确定*信号和zui低背景应将捕获抗体(0.5-4μg/ml)和检测抗体(0.25-2μg/ml)在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时,应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。
    10、标准品的配制:对于每种细胞因子应仔细阅读说明书,注意每批的细节。在使用细胞因子前,瞬时离心试剂瓶,尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节,将冻干的细胞因子复溶。
    11、一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做82倍系列稀释从2000pg/ml15pg/ml。可利用标准的elisa操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
    12、为了优化灵敏度,建议过夜孵育标准品和标本。
    13、若使用过氧化物酶作为显色系统,应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。
    14、当测定混合液体中的抗原时,如血清,建议在标本稀释液中加不相干的Ig
上海沪宇公司每周都会有实验知识以及动态等等,本周主题讨论在elisa实验之前需要做好哪些准备工作,如果您还有什么不懂的或者需要了解其它技术、产品信息都可以我公司王。

 

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