（1）HAT选择杂交瘤细胞 　　　

    脾细胞和骨髓瘤细胞经PEG处理后，形成多种细胞的混合体，只有脾细胞与骨髓细胞形成的杂交瘤细胞才有意义。在HAT选择培养液中培养时，由于骨髓瘤细胞缺乏胸苷激酶或次黄嘌呤*核糖转移酶，故不能生长繁殖，而杂交瘤细胞具有上述两种酶，在HAT选择培养液可以生长繁殖。

　　在用HAT选择培养1～2天内，将有大量瘤细胞死亡，3～4天后瘤细胞消失，杂交细胞形成小集落，HAT选择培养液维持7～10天后应换用HT培养液，再维持2周，改用一般培养液。在上述选择培养期间，杂交瘤细胞布满孔底1/10面积时，即可开始检测特异性抗体，筛选出所需要的杂交瘤细胞系。在选择培养期间，一般每2～3天换一半培养液。

（2）抗体的检测　　 

    检测抗体的方法应根据抗原的性质、抗体的类型不同，选择不同的筛选方法，一般以快速、简便、特异、敏感的方法为原则。放射免疫测定（RIA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）及免疫荧光试验为常用的检测方法。

    放射免疫测定可用于可溶性抗原、细胞McAb的检测；酶联免疫吸附试验可用于可溶性抗原、细胞和病毒等McAb的检测；免疫荧光试验则适合于细胞表面抗原的McAb的检测；其它还有间接血凝试验、细胞毒性试验、旋转粘附双层吸附试验等方法。