细胞：HFLS-RA细胞
中文名称：人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞
生长特性：贴壁细胞
培养基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)
1. 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在 1-2min)
2. 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。
3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。
4. 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液(每周 2-3 次)，待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。
(网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；)
内毒素所致SIRSMODS小鼠脾细胞损伤的形态学观察
目的应用大肠杆菌内毒素脂多糖(LPS)腹腔注射制备小鼠全身炎症反应综合征/多器官功能失常综合征(SIRS/MODS)模型.
方法:
用免疫组化的方法检测了Bcl-2的表达.
结果随LPS作用时间的延长,脾损伤逐渐加重.HE染色中,生发中心和动脉周围淋巴鞘分别在LPS注射后9小时和18小时出现大量深浅不一的颗粒状细胞碎片.
TUNEL阳性染色细胞随时间延长而增多.电镜下可见到凋亡的淋巴细胞.在18小时还见到细胞坏死现象.
Bcl-2的表达随着LPS作用时间的延长而明显下降,与TUNEL染色的相关分析表明,Bcl-2的表达与细胞凋亡有显著的负相关.
结论在LPS所致的SIRS/MODS模型中,脾细胞损伤以凋亡为主,随LPS作用时间延长而加重,在晚期还会出现细胞坏死.Bcl-2参与了LPS引起的脾细胞凋亡效应.
