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牛牛天天人人综合影院 KYSE-30细胞 (人食管磷癌细胞)

时间:2025/5/20阅读:6
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  细胞:KYSE-30细胞
 
  中文名称:人食管磷癌细胞
 
  生长特性:贴壁细胞
 
  培养基:1640 培养基  血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
 
  冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
 
  细胞常规培养传代流程( 请严格遵照无菌操作)
 
  1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS 缓冲液润洗细胞两次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在 1-2min)
 
  2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散。
 
  3. 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
 
  4. 注意培养基 PH 值变化情况,定期换液(每周 2-3 次),待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。
 
  (网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)
 
  分离出具生殖潜能干细胞
 
  在母体中发育了50天的猪胎儿皮肤组织中分离出一些干细胞,这些干细胞具有某种分化成具有卵母细胞特性的细胞的内在机制。
 
  用诱导分化的条件培养基培养这些干细胞时,发现其中的一个亚群可以表达一些只有sheng殖细胞才能特异表达的基因和蛋白。
 
  根据形态学观察,发现所培养的细胞从诱导分化的第10天开始,形成了克隆样结构,其中的一些克隆样结构逐渐从培养皿上脱壁,呈“囊泡状聚集体”悬浮于培养基中。在很多囊泡状聚集体中央有一个较大的细胞,这与同sheng殖有关的卵母细胞复合体结构非常相似。
 
  如果将这些囊泡状聚集体放入供卵母细胞生长的培养基中,经过长时间的培养,囊泡状聚集体中的细胞亚群可以将位于中央部分的大细胞挤出;进一步培养这些“大细胞”,最终可以长成直径为80-100?滋m的细胞。
 
  为了检测这些大细胞是否表达了具有卵母细胞代表性的标记分子,将这些大细胞挑出,分组提取RNA。
 
  RT-PCR的检测结果表明,在这些“大细胞”以及作为阳性对照的卵巢组织中,均可以检测到所有卵母细胞特异表达的标记分子物。
 

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