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上海邦景实业有限公司
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细胞培养过程中pH值下降解决方法
2022-8-15 阅读(329)
大多数细胞适宜的pH为7.0~7.4，偏离此范围可能对细胞生长产生有害的影响。但各种细胞对pH的要求也不*相同，原代培养的细胞一般对pH变动耐受力差，无限细胞系耐受力强。细胞培养过程中pH值下降产生的原因有很多。在细胞生长非常快时，pH值通常下降得很快，此时可以通过及时传代、提高传代比例或降低血清量等方法进行解决。此外，培养瓶盖拧得过紧、NaHCO3缓冲系统缓冲能力不够、培养液中盐浓度不正确、细菌、酵母或真菌污染等也能导致pH值通常下降得很快。这时，可以通过以下几种方法解决：
1、增加培养液中NaHCO3浓度或减少培养箱内CO2浓度。NaHCO3含量在2.0 g/L到3.7 g/L之间时对应的CO2浓度为5~10%；
2、 改用不依赖CO2培养液；
3、 适当松开瓶盖。在培养液中加HEPES缓冲液，使终浓度为10~25 mM；
4、在CO2培养环境中改用基于Earle's盐配制的培养液，在大气培养环境中培养改用Hanks'盐配制的培养液；
5、 如果是污染造成的则丢弃培养物或用抗生素除菌。
