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上海邦景实业有限公司
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PCR反应技术特点
2022-11-23 阅读(317)
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)是一项利用 DNA 双链复制原理,在生物体外复制特定 DNA 片段的的核酸合成技术。可在短时间内大量扩增目的 DNA 片段,而不必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物体。
1、灵敏度高
PCR 产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg = 10-12)量级的起始待测模板扩增到微克(μg=-6)水平。能从 100 万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR 的灵敏度可达 3 个 RFU(空斑形成单位);在细菌学中最小检出率为 3 个细菌。
2、特异性强
PCR 反应的特异性决定因素:
引物与模板 DNA 特异正确的结合;
碱基配对原则;
Taq 聚合酶合成反应的忠实性;
靶基因的特异性与保守性。
3、简便、快速
只需要一次性将反应液加好后,就可以进行扩增。一般 2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
4、纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及 RNA 均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗漱液、毛发、细胞、活组织等 DNA 扩增检测。