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PCR反应技术特点

2022-11-23  阅读(317)


聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)是一项利用 DNA 双链复制原理,在生物体外复制特定 DNA 片段的的核酸合成技术。可在短时间内大量扩增目的 DNA 片段,而不必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物体。


1、灵敏度高 

PCR 产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg = 10-12)量级的起始待测模板扩增到微克(μg=-6)水平。能从 100 万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR 的灵敏度可达 3 RFU(空斑形成单位);在细菌学中最小检出率为 3 个细菌。

 

2、特异性强 

PCR 反应的特异性决定因素:

引物与模板 DNA 特异正确的结合;

碱基配对原则;

Taq 聚合酶合成反应的忠实性;

靶基因的特异性与保守性。


3、简便、快速

只需要一次性将反应液加好后,就可以进行扩增。一般 2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。

 

4、纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及 RNA 均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗漱液、毛发、细胞、活组织等 DNA 扩增检测。

 

 




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