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保存已获得的抗体重点详述

2023-9-11  阅读(85)

    抗体无论是保存还是运输都应尽可能地避免反复冻融,收到抗体后请根据实验的需要,对抗体进行分装,避免同一管抗体反复冻融(反复冻融会导致抗体空间结构变 性,导致多聚体形成,从而降低抗体的结合能力)。抗体保存得当与否,直接决定了抗体的活性和使用效果,如果抗体保存得当,抗体活性大部分都可以维持数年。 请谨记,无论何时请按照说明书推荐的保存条件正确处理和保存抗体。


1. 收到抗体后,请务必在4℃,12000rpm,离心3分钟,(无论是液体还是冻干粉状态),再打开管盖进行分装和保存(如果抗体体积小于50ul,请延长 离心时间至5分钟,以保证全部抗体均离心下来)。抗体一般使用特制的储存管,只有在12000rpm离心3分钟,才能将附着在管壁或盖内的抗体全部离心下 来(即使是在10000rpm离心也会离心不wan全,导致出现抗体的量不足的现象)。


2. 对于ProSci大部分抗体,比较合适的保存方式是,分装后保存在-20℃或者-80℃。

(1)对绝大多数抗体来说,保存在-20℃就wan全足够了,没有任何证据显示保存在-80℃会更好。

(2)分装可以最da 程度的降低反复冻融对抗体活性的损害,同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体造成的污染可能性。

(3)分装的量以一次实验用完为好,最少不能少于10ul每份。因为分装体积越小,抗体的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响。

(4)复融后的分装抗体如果一次用不完,将剩余母液保存在4℃,避免再冻起来。

(5)抗体工作液应该当天配制当天用完,4℃保存尽量不要超过1天。

(6)绝对避免将抗体保存在自动除霜冰箱中,将抗体保存在冰箱里层,避免温度变化造成反复冻融。


3. 大部分抗体收到后4℃短暂保存1~2周对抗体活性没有影响。


4. 大部分抗体的运输条件:一般的运输过程需要1~2周的时间,所以是在低温4℃的条件下来完成的。

4℃运输最主要的目的是为了避免反复冻融对抗体活性的损害(如果使用干冰运输,那么收到时抗体是冻起来的,为了分装就需要解冻,这就多了一次冻融的过程),所以运输过程中绝对避免干冰运输。





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