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血清铁浓度测试盒(比色法)测定与注意事项
2023-11-20 阅读(120)
血清铁浓度测试盒(比色法)测定与注意事项:
一、测定:
1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到520 nm,蒸馏水调零。
2. 标准液解冻:提前取出标准液,置于室温下充分解冻后混匀。
3. 空白管:取EP管,依次加入125 μL蒸馏水,125 μL试剂一,125 μL试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62 μL氯仿(自备),充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210 μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm测定吸光度,记为A空白管。
4. 标准管:取EP管,依次加入125 μL标准液,125 μL试剂一,125 μL试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62 μL氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210 μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm测定吸光度,记为A标准管。
5. 测定管:取EP管,依次加入125 μL血清,125 μL试剂一,125 μL试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62 μL氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210 μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm测定吸光度,记为A测定管。
注意:空白管和标准管只需测定一次。
血清铁浓度计算公式:
血清铁含量(μmol /dL)=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总
=10 × (A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
C标准液:100 μmol/L Fe3+标准液;V总:标准液总体积1mL;1 dL=0.1 L。
二、注意事项:
1、血清铁含量少,所用器皿(EP管)需要注意,避免被铁污染。
2、试剂一和试剂二溶液不稳定,需现配现用,新配制的试剂只能当天使用。
3. 检出限为1μmol/L。
1. 分光光度计/酶标仪预热30 min,调节波长到520 nm,蒸馏水调零。
2. 标准液解冻:提前取出标准液,置于室温下充分解冻后混匀。
3. 空白管:取EP管,依次加入125 μL蒸馏水,125 μL试剂一,125 μL试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62 μL氯仿(自备),充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210 μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm测定吸光度,记为A空白管。
4. 标准管:取EP管,依次加入125 μL标准液,125 μL试剂一,125 μL试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62 μL氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210 μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm测定吸光度,记为A标准管。
5. 测定管:取EP管,依次加入125 μL血清,125 μL试剂一,125 μL试剂二,混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62 μL氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210 μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520 nm测定吸光度,记为A测定管。
注意:空白管和标准管只需测定一次。
血清铁浓度计算公式:
血清铁含量(μmol /dL)=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总
=10 × (A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
C标准液:100 μmol/L Fe3+标准液;V总:标准液总体积1mL;1 dL=0.1 L。
注意事项:
1、血清铁含量少,所用器皿(EP管)需要注意,避免被铁污染。
2、试剂一和试剂二溶液不稳定,需现配现用,新配制的试剂只能当天使用。
3. 检出限为1μmol/L。