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上海邦景实业有限公司
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细胞转染实验一般过程步骤
2023-12-4 阅读(252)
转染，是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。细胞转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术。应用在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中。
细胞转染实验一般过程步骤:
1. 转染试剂的准备
① 将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。
② 震荡后将试剂放在-20摄氏度保存，使用前还需震荡。
2. 选择合适的混合比例(1:1-1:2/脂质体 体积:DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA，震荡后在加入合适体积的转染试剂，再次震荡。
3. 将混合液在室温放置10―15分钟。
4. 吸去培养板中的培养基，用PBS或者无血清培养基清洗一次。
5. 加入混合液，将细胞放回培养箱中培养一个小时。
6. 到时后，根据细胞种类决定是否移除混合液，之后加入*培养基继续培养24-48小时。
