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单克隆抗体的制备及应用范围

2024-1-29  阅读(99)

单克隆抗体是仅与目标蛋白某一特定表位结合的单一抗体。

单克隆抗体的制备:

简单来说就是将免疫原注射到宿主动物体内产生免疫反应,之后把 B 细胞从脾脏中移出,单种 B 细胞与骨髓瘤细胞融合为 B 细胞杂交瘤,成为一个永生化胞株。这样一来,杂交瘤的 B 细胞就会一直产出只识别单一表位的单克隆抗体,通常这个胞株会有一个特定的克隆号(clone number),用来与其他胞株区分。杂交瘤接下来可以被注射到小鼠的腹腔中大量生产,杂交瘤分泌富含抗体的一种液体,被称作腹水,用注射器抽取纯化,就可获得大量的单克隆抗体。

单克隆抗体更适用于:
1、检测单一抗原
2、检测蛋白质家族的单一成员
3、不同实验/批次的抗体检测结果稳定一致
4、细胞染色背景较低-很适用于 IHC、ICC、IF 等应用
5、量化蛋白质表达 (例:流式或荧光细胞分选)
6、探测分子结构变化
7、探测磷酸化状态的变化
8、为 X 射线晶体测试探测目标
9、制作缺少特定细胞类型的动物模型
10、免疫治疗

单克隆抗体不建议用于:
1、根据同源性检测不同物种的目标蛋白;
2、检测浓度较低的目标蛋白;
3、检测形态变化了的蛋白。



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