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微生物培养基配置步骤及注意事项
2024-4-28 阅读(68)
培养基( culture medium)是人工配制的，适合微生物生长、分离鉴别的营养基础。一般基础培养基中古有蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化钠、琼脂等基本营养物质。微生物培养基应用范围很广。例如，无菌试验培养基可检查药品、生物制品是否污染细菌，它直接关系到人民用药安全；在临床及食品卫生检验中常用选择、鉴别培养基，此类培养基中根据用途不同，需要加入抑菌剂、指示剂、血液、糖等试剂，以利于特定细菌的分离与鉴别，需要使细菌大量生长、繁殖的各类培养基；病毒培养及疫苗中则需用组织细胞培养液，主要成分为多种氨基酸、核苷酸、无机盐、生长因子等。配置微生物培养基需要
配置微生物培养基步骤：
1、准确称量试剂：根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。
2、校正pH值：将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1NNaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
3、过滤：将玻璃漏斗置铁架上，再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。
4、分装：将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100～150ml)，塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。
5、灭菌：培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因此，在同一温度条件下，采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下，菌体吸收水分后，其蛋白质易于凝固变性，因为蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。
配置微生物培养基注意事项：
1、根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。
2、注意各种营养物质的浓度及合适配比，保持合适渗透压。
3、将培养基的 pH 控制在适宜的范围之内，以利于不同类型微生物的生长繁殖或代谢产物的积累。
4、要注意各种原料的配比，每种培养基的配比合适的配比，可以按照老师的要求去做。
5、如需要加热的时候注意时间的把握。
