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上海邦景实业有限公司
主营产品： 进口elisa试剂盒，细胞株，细胞系，菌种 |
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ELISA测定温育过程注意事项
2024-7-15 阅读(68)
在ELISA试剂盒中一般有两次抗原抗体反响，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反响的完结需求有必定的温度和时刻，这一保温进程称为温育(incubation)，有人称之为孵育。
实际测定操作注意事项：
1、不同的温育环境对检测结果有影响，操作中应严格按照说明书控制温育时间及温度，并注意封闭避免边缘效应。
2、为确保各板温度都能迅速达到平衡，不可将反应板叠加放置，设定的温度及时间严格按照说明书进行，一般加入待测标本后使其与固相抗原(抗体)置于37℃环境下温育。因为很多恒温箱的构造，温度及检测的温度并非酶标板温育温度，所以使用恒温箱温育时建议将温度计置于酶标板旁，保证酶标板旁温度为37℃。
3、干育和水温的影响差异较为明显，建议使用水温，注意将固相板放入水中，防止受热不均匀。
4、试剂盒一般设定的反响温度为 37℃，在这个温度下放置 30 分钟，蒸腾的水分会许多，对于全部反响体系来讲，各种反响物的浓度会不断添加，这么必会致使反响毕竟的值添加，温育时贴封片或加盖，避免标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁。
5、试剂盒断定的一定温度下的反响时间并不是反响的完毕，添加反响的温度，会加速反响，一样添加时间会延伸反响，这么得到的反响程度会比试剂盒断定的反响程度多，也会引起阴性高值或假阳性。
6、实验操作的严谨性与实验操作规范密不可分，未使用的试剂应储存于2-8℃，使用时应回温到室温(20-25℃)。切忌不同批次的试剂混合使用，要经常检查酶标仪和微量移液器的精度和准备度…… ELISA看起来很简单，但是在实际操作过程中，绝不能掉以轻心，除了严谨规范的实验操作，高品质的试剂盒与专业的技术团队也是获得准确结果的保证！
