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上海邦景实业有限公司
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抗体稳定性好原因及检测分析
2025-2-24 阅读(62)
抗体应该是蛋白中属于比较稳定的，其Tm值基本上在70度左右。但是这只是跟其它的蛋白相比，作为生物大分子蛋白的本身属性，抗体还是存在不稳定性，会失活降解。目前抗体在研发以及医疗领域广泛应用，如若其活性变化将造成不可预知的后果，因此完善的抗体稳定性的检测方法是目前抗体市场bu可或缺，通过检测确定其可用的条件以及有效期限。
抗体在室温、37℃保存与-20℃保存具有一样的活性与稳定性。之所以这种抗体具有这样良好的稳定性，主要原因有四个方面：
1. 抗体纯度
高纯度的抗体产品，去除了包括各种蛋白酶在内的杂质，保证了抗体的稳定性。采用先进的抗体纯化技术，确保抗体产品的高纯度，保障其抗体产品的稳定性。
2. 抗体浓度
高浓度的抗体产品可减少容器表面吸附造成的物质损失。抚生抗体产品中，93%的浓度大于0.5mg/ml。抗体产品浓度普遍大于业内水平。
3. 抗体的稳定性是自然界长期进化的结果
抗体是免疫系统中最重要的分子之一，其稳定性是自然进化筛选的结果。在众多物种中，抗体分子形成了保守而稳定的结构，分子中70% 氨基酸残基(免疫球蛋白结构域)以beta片层(beta-sheet)形式堆叠，形成紧密并能耐受蛋白酶作用的“三明治"结构，轻链和重链通过保守的二硫键形成具有三个结构域的免疫球蛋白，大大提高了分子本身的稳定性。
4. 抗体分子的高Tm值
有数据表明，在70℃时抗体分子才开始明显地去折叠(unfold)，而这一过程之前的变化也具有相当的可逆性。也就是说，在室温下，甚至短时间温度达到50-60度，抗体分子都能维持正确折叠，保持应有的活性。
目前主要有3种检测抗体稳定性的方法：
1、长期实验亦可叫Real time：将抗体存放在实际保存温度，在不同的时间点取出后检测其上述抗体特性，如2个月检测一次，直至抗体不再具有相应产品特性，此期限则为其有效的使用和保存期限。
2、加速稳定实验：将抗体放入高温存储条件，如室温、37℃等，亦是在不同的时间点取出后检测其上述抗体特性，一般是1天检测一次，直至抗体不再具有相应产品特性，根据其抗体在高温失活的期限推算其在实际存放条件下的保存和使用期限。
3、反复冻融：冻融对抗体活性会有较大的影响，因此可通过反复冻融来检测抗体的稳定性，冻融一次检测一次，直至抗体不再具有相应产品特性。
此外，严格情况下还需要进行运输条件的模拟，测试抗体在其运输过程中的稳定性。
对于长期实验不一定要做到抗体失活为止，但加速稳定和反复冻融一般要求是要做到抗体失活为止。
