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抗原的要求与抗原效价的测定

2025-3-31  阅读(40)

  1、抗原的要求:
 
  用于ELISA的抗原必须采用相当纯的抗原,如果含有其它杂质,将与抗原共同竞争固相载体上的有限位置。用于其它血清学反应的抗原不一定能适用ELISA实验,必须经过试验,抗原必须能牢固地吸附于载体上,而不丧失其免疫活性,且可得到有规律的重复的结果。另外在吸附载体后,对加入的各种试剂产生最小的非特异性吸附,即与阴、阳性血清结合差异较大。
 
  2、抗原效价的测定
 
  可采用单方阵或双方阵试验。①单方阵试验:以不同稀释度的抗原包被酶标板,以常规的1﹕200倍稀释的阳性血清加入,再加入酶标抗体、显色、测OD值,以OD值为1.0时,相应的抗原浓度作为使用效价;②双方阵试验比较精确,它既能测出抗原的最适浓度又能测出抗体的最适浓度。即将抗原抗体均稀释成不同浓度进行酶标抗体反应,以血清稀释倍数最高的阴、阳性血清的光吸收值差最大的所对应的抗原稀释度为抗原的使用效价。
 
  已吸附的抗原的固相载体经冻干或干燥保存很稳定,数月仍不失活。


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