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大鼠肝细胞瘤的实验步骤

2018-12-20  阅读(439)

大鼠肝细胞瘤  实验步骤:


1 在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。


2 分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗生素加入到每一个孔中。例如,下列浓度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。


3 每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。


4 确定抗生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2-3倍浓度的抗生素的培养液培养细胞2-3代。


5 在无抗生素的培养基中培养细胞一代。


6 重复步骤4。


7 在无抗生素的培养基中培养4-6代,确定污染是否以已被消除。



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