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上海邦景实业有限公司
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关于人源细胞系如何培养及其他
2019-4-9 阅读(757)
关于人源细胞系如何培养及其他：
1 贴壁细胞生长缓慢；适当提高血清浓度（不能超过20%），或可根据该细胞生长特性生长密度，考虑消化后，转移到新的培养瓶继续培养
2 如果人源细胞系为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加15%血清的*培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的*培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时实验室技术人员会跟进解决
3 生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养
人源细胞系常规培养传代流程
（1）吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2-3ml 0.25%进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在1-2min）
（2）注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存
（3）取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的*培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养
（4）镜下观察消化情况，在HS505.T人淋巴结成纤维样细胞生长特性边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉，加6-8ml*培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。
