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细胞培养中与支原体的战争
2019-5-16 阅读(542)
细胞培养中与支原体的战争
支原体号称细胞培养中的大敌。它就像man性du药,杀细胞于无形中。据统计,超过25%的细胞系中感染了支原体,而研究者大多并不知晓。常规检测可以降低支原体意外污染的机会,但并不能*避免。
在细胞培养中,我们通常使用0.2微米的滤膜来去除污染物。然而,这道防线只能阻挡细菌,而无法阻挡支原体。因支原体更小(约为0.15-2 µm),而且形状灵活,故总是能逃过我们传统的滤膜。这时,我们有必要升级秘密技巧,与支原体斗争到底。
如何升级呢?选用孔径更小的滤膜,这也许是个不错的主意。目前市场上有多家公司提供0.1微米的滤膜,如赛默飞世尔。Thermo Scientific Nalgene 0.1微米滤器具有*的Nalgene Rapid-Flow™ 膜支持系统,有四种容量可供选择:150mL、250 mL、500 mL 以及1000 mL。Rapid-Flow™ 系统采用多排柱状结构,使得膜系统相较于其他过滤商使用的辐射辐条设计更加均一稳定。据称,这种设计特点能使滤膜通过更大的流速和通量。是不是这样呢?赛默飞世尔的研究人员将Nalgene 0.1微米滤器与市场上的类似产品进行了性能比较。
谁来参加这场比赛?除了Nalgene Rapid-Flow™ 1000mL 滤器、Rapid-Flow™ 500mL 滤器,还有两个强劲的对手,它们分别是M品牌的1000mL 滤器、和C品牌的500mL 滤器。当然,这些都是0.1微米PES滤膜。测试的液体是经典的细胞生长培养基:DMEM+10% FBS(胎牛血清)及RPMI 1640+10% BGS(成牛血清)。
比什么?流速和堵塞体积。研究人员记录DMEM+10% FBS 和RPMI 1640+10% BGS 每滤出100mL 的时间点,直至滤器堵塞(即每秒滤出一滴液体或过滤100ml 液体超过2 分钟)或者1L DMEM+10% FBS、RPMI 1640+10% BGS液体过滤完毕。