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上海邦景实业有限公司
主营产品： 进口elisa试剂盒，细胞株，细胞系，菌种 |
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植物细胞组织培养实验操作
2019-7-5 阅读(410)
植物细胞组织培养实验操作
研究目的 植物细胞组织培养实验动物以后分布情况，从而实现移植细胞的追踪。特别是萤火虫荧光素酶标记的细胞，在小动物体内移植以后，可以利用小动物活体成像仪实现细胞移植后的活体细胞追踪。
实验材料：
仪器设备：1．酒精灯、三角烧瓶，培养皿；2．镊子、剪刀、剖针；3．双筒解剖显微镜；4．光照培养箱或温室；
材料烟草无菌苗、豌豆幼苗。
试剂
（1）MS培养基，植物激素：NAA、6-BA等；
（2）饱和漂液（次氯酸钠）；
（3）70%酒精、100%酒精、酒精棉球；
（4）无菌水
四．实验步骤
豌豆苗的茎尖培养
⑴取发芽6天的豌豆幼苗10株，简取1厘米左右的茎尖，浸入70%的酒精中1分钟，再浸入饱和次氯酸钠溶液中消毒15分钟，（此步以后要求无菌）用无菌水中冲洗5次，在灭菌的滤纸上吸干水分，放入灭菌的培养皿中。
⑵在双目解剖镜下，用灭菌的解剖针剥去幼叶露出生长锥，用灭菌的解剖针挑取带着两至三个叶原基的生长锥。
⑶将挑好的茎尖移到MS+10.7μmol/L萘乙酸(NAA)+4.4μmol/L6-苄基腺嘌呤（6-BA）的培养基上诱导愈伤组织形成，用封口膜将培养皿封好。
（4）在恒温培养箱中，26℃下,培养六周，形成愈伤组织，经继代后，可用于生根培养
