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上海邦景实业有限公司
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人胚肾细胞操作步骤
2020-8-26 阅读(478)
人胚肾细胞操作步骤：
1. 人胚肾细胞可于白色布景上，直接用肉眼查询效果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+"、“-"号表示。也可测OD值：在人胚肾细胞仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
2. 加酶标抗体：于各反应孔中，参与新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗刷。
3. 加底物液显色：于各反应孔中参与临时制作的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
4. 停止反应：于各反应孔中参与2M硫酸0.05ml。
5. 效果判定：可于白色布景上，直接用肉眼查询效果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+"、“-"号表示。也可测OD值：人胚肾细胞类检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。人胚肾细胞类用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃过液。次日洗刷3次。
6. 加一定稀释的待检样品（不知道抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗刷。（一同做空白、阴性及阳性孔对照）
7. 于反应孔中，参与新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml，37℃孵育30-60分钟，洗刷,zui后一遍用DDW洗刷。
8. 于各反应孔中参与人胚肾细胞临时制作的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟
9. 于各反应孔中参与2M硫酸0.05ml
特丁隆 标准品 ：34014-18-1 250mg
四氯硝基苯 标准品 ：117-18-0 250mg
氟苯脲 标准品 ：83121-18-0 250mg
七氟菊酯 标准品 ：79538-32-2 100mg
双硫磷 标准品 ：3383-96-8 250mg
得杀草 标准品 ：149979-41-9 100mg
特草定 标准品 ：5902-51-2 250mg
特丁磷 标准品 ：13071-79-9 100mg
特丁净 标准品 ：886-50-0 250mg
