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兔瘟 RT-PCR 检测试剂盒注意事项几点

2021-3-23  阅读(202)

兔瘟 RT-PCR 检测试剂盒原理

提取样品 RNA,在反转录酶的作用下,以RNA 为模板,以引物为起点合成与 RNA 模板互补的 cDNA 链。在 TaqDNA 聚合酶的作用下,经高温变性、低温退火、中温延伸的循环,使特异DN段的拷贝数放大一倍。经过多次循环,*终使扩增DN段放大了数百万倍。将扩增DN段进行电泳,经染色后,在紫外灯照射下,肉眼可见到 DN段的扩增带。

兔瘟 RT-PCR 检测试剂盒注意事项

1. 建议与世亨提供的柱式 RNA 核酸提取试剂盒(含电泳试剂)配套使用。

2. 实验过程中进行阴性对照和阳性对照样品的质量控制,需进行提取,建议提取用量分别100µL。

3. 所有接触病料的物品均应合理处置,以免污染实验室。

4. PCR 整个试验分配液区、模板提取区、扩增区、电泳区。流程顺序为配液区→模板提取区→扩区→电泳区。严禁器材和试剂倒流。

5. 所有试剂应在规定的温度储存。-20℃保存的各试剂管使用前应*融化,8000rpm 离心15s,使液体全部沉于管底,放于冰盒中,吸取液体时移液器吸头尽量在液体表面层吸取,使用后立即放回-20℃。

6. 注意防止试剂盒组分受污染。不要使用超过有效期限的试剂,试剂盒之间的成分不要混用。

7. 严格遵守操作说明可以获得的结果。操作过程中移液、定时等全部过程必须精确。

8. 反应体系应在特定配液区或者超净工作台中配制,整个实验过程严格控制污染。

9. 反复冻融试剂将减低检测灵敏度,本试剂盒应在 3 次内用完。



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