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上海邦景实业有限公司
主营产品： 进口elisa试剂盒，细胞株，细胞系，菌种 |
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病毒转化细胞实验步骤
2021-6-17 阅读(415)
病毒转化细胞实验步骤如下：
1、血液制备: 柠檬酸 (Citric Acide)或 肝素 抗凝取血1～2ml,分装入管中,每管0.5ml全血,置于4℃冰箱中30分钟.
2、EBV病毒转化:从液氮中取出冻存的0.5ml全血,在37℃水中迅速解冻.
3、将解冻细胞与10ml不含血清的RPMI 1640混合,2500 rpm离心2分钟,弃上清,用含20％的胎牛血清、青、和的RPMI 1640生长培养基重悬细胞.
4、加入0.3～0.5ml的EBV病毒液,37℃水浴30分钟～2小时,并不时摇动,以免出现凝块.
5、分装入50ml的培养瓶中,同时补加适量培养液,置入含5％CO2温箱中,100％温度下培养.
6、一周后加补入2ml 培养基 .
7、经常镜检培养物,每3～4天加液或换液,随细胞数量增多,可分装入大瓶中培养.
