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微生物实验间歇灭菌具体过程

2021-11-8  阅读(1204)

微生物检测用的玻璃器皿、金属用具及培养基、被污染和接种的培养物等,必须经灭菌后方能使用。

下面介绍间歇灭菌具体过程:
1、灭菌方法系利用不加压力的蒸气灭菌,某些物质经高压蒸气灭菌容易破坏,可用此法灭菌。
(1)将欲灭菌物品置于锅内,盖上顶盖,打开排水口,使器内余水排尽。
(2)关闭排水口,打开进气门,根据需要消毒10~20min。
(3)灭菌完毕关闭进气门,取出物品待冷至室温温度,放入37℃温箱过夜,次日仍按上述方法消毒,如此三次,即可达到灭菌目的。

2、血清凝固器使用方法,培养基中含有血清或鸡蛋特殊成份时,因高热会破坏其营养成份,故用低温,可使血清凝固,又可达到灭菌目的。
(1)在使用该法灭菌的血清等分装时,需严格遵守无菌操作,试管、平皿也经灭菌后使用。
(2)将培养基按要求使成斜面或高层,加足水后,接上电源,升温75~90℃1h灭菌,放37℃温箱过夜,再如此灭菌三次。

3、煮沸消毒:可用煮锅或煮沸消毒器,水沸腾后再煮5~15min,也可在水中加入2%石炭酸煮沸5min,加入0.02%甲醛,80℃煮60min均可达到灭菌目的,但选用煮沸消毒的增消剂时,应注意对物品的腐蚀性。

4、灭菌处理:灭菌后物品,按正常情况已属无菌,从灭菌器中取出应仔细检查放置,以免再度污染。
(1)物品取出,随即检查包装的完整性,若有破坏或棉塞脱掉,不可作为无菌物品使用。
(2)取出的物品,如为包装有明显的水浸者,不可作为无菌物品使用。
(3)培养基或试剂等,应检查是否符合达到灭菌后的色泽或状态,未达到者应废弃。
(4)启闭式容器,在取出时应将筛孔关闭。
(5)取出的物品掉落在地或误放不洁这处,或沾有水液,均视为受到污染,不可作为无菌物品使用。
(6)取出的合格灭菌物品,应存放于贮藏室或防尘柜内,严禁与未灭菌物品混放。
(7)凡属合格物品,应标有灭菌日期及有效期限。
(8)每批灭菌处理完成后,记录灭菌品名、数量、温度、时间、操作者。



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