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小鼠杂交瘤细胞特性及操作步骤

2022-2-14  阅读(463)

小鼠杂交瘤细胞特性:
1)细胞来源于人胎盘组织。
2)细胞鉴定:血小板-内皮细胞粘附分子(PECAM-1/CD31)或血管假性血友病因子(vWF)免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%
4)不含有 HIV-1 HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。

小鼠杂交瘤细胞操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37温箱培养。



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