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南京亿迅生物科技有限公司
主营产品： 质控样品,人工血清,人工胃液,elisa试剂盒,化学试剂,生物试剂 |
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快速限制性内切酶质量控制
2023-5-5 阅读(369)
快速限制性内切酶质量控制
产品描述
FuniCut™系列内切酶是通过基因工程重组技术，可在5~15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶，适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA等。FuniCut™系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液，从而简化了酶切反应体系，另外，有良好的酶活冗余度，可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。
识别位置
5'-↓GATC-3'
3'-CTAG↑-5'
推荐反应条件
1× FuniCut™ 缓冲液；
最适37°C孵育。
失活条件
80°C孵育20 min。
注意事项
1）3 h孵育未表现星号活性，延时酶切可能出现星号活性；
2）受Dam甲基化影响，序列完-全重叠，剪切阻断；
3）受EcoBI甲基化影响，序列可能重叠，剪切阻断；
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作；
5）本产品仅作科研用途！
质量控制
1. 功能活性检测：最适反应温度下，在20 μL反应体系中，1 μL酶能够在15 min内完-全消化1 μg λDNA (Dam-)。
2. 超长时间孵育检测：最适反应温度下，将1 μL酶与1 μg λDNA (Dam-)共孵育3 h，未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解，但延长孵育时间可能出现星号活性。
3. 酶切-连接-再酶切检测：最适反应温度下，使用1 μL酶消化底物，回收酶切产物，在22°C下使用适量T4 DNA连接酶可以将酶切产物重新连接，将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。
4. 非特异性内切酶活性检测：最适反应温度下，将1 μL酶与1 μg超螺旋质粒DNA共同孵育4 h后，使用琼脂糖凝胶电泳检测，质粒DNA仍然处于超螺旋状态。
