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快速限制性内切酶质量控制

2023-5-5  阅读(369)

快速限制性内切酶质量控制


产品描述

FuniCut™系列内切酶是通过基因工程重组技术,可在5~15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶,适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA等。FuniCut™系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液,从而简化了酶切反应体系,另外,有良好的酶活冗余度,可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。


识别位置

5'-↓GATC-3'

3'-CTAG↑-5'


推荐反应条件

1× FuniCut™ 缓冲液;

最适37°C孵育。


失活条件

80°C孵育20 min。


注意事项

1)3 h孵育未表现星号活性,延时酶切可能出现星号活性;

2)受Dam甲基化影响,序列完-全重叠,剪切阻断;

3)受EcoBI甲基化影响,序列可能重叠,剪切阻断;

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作;

5)本产品仅作科研用途!


质量控制

1. 功能活性检测:最适反应温度下,在20 μL反应体系中,1 μL酶能够在15 min内完-全消化1 μg λDNA (Dam-)。

2. 超长时间孵育检测:最适反应温度下,将1 μL酶与1 μg λDNA (Dam-)共孵育3 h,未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解,但延长孵育时间可能出现星号活性。

3. 酶切-连接-再酶切检测:最适反应温度下,使用1 μL酶消化底物,回收酶切产物,在22°C下使用适量T4 DNA连接酶可以将酶切产物重新连接,将连接产物再次回收后,使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。

4. 非特异性内切酶活性检测:最适反应温度下,将1 μL酶与1 μg超螺旋质粒DNA共同孵育4 h后,使用琼脂糖凝胶电泳检测,质粒DNA仍然处于超螺旋状态。




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