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南京亿迅生物科技有限公司
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人转铁蛋白（TRF）ELISA检测试剂盒操作说明！
2021-12-22 阅读(755)
人转铁蛋白（TRF）ELISA检测试剂盒操作说明！
检测原理：
试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人转铁蛋白（TRF）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并澈底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人转铁蛋白（TRF）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
产品名称：人转铁蛋白（TRF）ELISA检测试剂盒
产品规格：96T
储存条件：2-8℃，避光防潮保存
有效期：6个月
试剂盒组成
名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
标准品 | 0.3mL | 0.3mL | 无 |
样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
底物A | 6mL | 3mL | 无 |
底物B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
实验操作（仅供参考）：
1.从室温平衡60min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；
4. 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
注意事项：
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡60分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶玩全溶解后再使用。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3. 预处理后的样本无需稀释，直接取10μL加样即可。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
6.本产品仅供科研实验用，不做其它用途！
