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产品简介
产品中文名：Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒
产品英文名：Portelite™ Fluorimetric DNA Quantitation Kit
产品货号：17665
产品规格：100 Tests
产品概述
在进行各种分析的DNA样品制备中，DNA定量是一项非常重要的任务。 Portelite 荧光DNA定量试剂盒提供了使用Qubit荧光仪操作Helixyte Green BR快速定量dsDNA的方法。它针对Cytocite 和Qubit 荧光仪进行了优化。 Portelite 荧光DNA定量测定在三个数量级上呈线性。该测定法对RNA上的双链DNA（dsDNA）具有高度选择性，并针对测量10 pg / µL至10 ng / µL的dsDNA浓度进行了优化。Helixyte Green-BR与dsDNA结合后表现出较大的荧光增强，并且比UV吸光度读数高几个数量级。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒。
适用仪器
| 量子位荧光计 |
|
| Ex: | 480 nm |
| Em： | 530 nm |
| 规格: | 0.2 mL PCR 小瓶 |
| CytoCite 荧光计 |
|
| Ex: | 480 nm |
| Em： | 530 nm |
| 规格: | 0.2 mL PCR小瓶 |
实验方案
样品实验方案
简要概述
1.准备Helixyte Green BR工作溶液
2.在每个0.2 mL PCR管中加入190 uL 1X Helixyte Green BR工作溶液
3.在每个试管中添加10 uL DNA标准溶液或测试样品
4.在室温下孵育2分钟
5.使用CytoCite 荧光仪或Qubit 检测荧光
注意：打开之前，请将所有成分置于室温下。
溶液配制
工作溶液配制
Helixyte Green-BR工作溶液：在DNA分析缓冲液（组分B）中稀释200倍Portelite dsDNA试剂（组分A）。 例如，要为8个样品准备足够的工作溶液，请将5uL Helixyte Green BR（组分A）添加到1mL DNA分析缓冲液（组分B）中。注意：通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作液免受光照。 我们建议在塑料容器中操作而不是玻璃中制备该溶液，因为染料可能会吸附到玻璃表面。 为了获得佳结果，应在准备后的几个小时内使用此溶液。
实验步骤
根据DNA样品的估计浓度，样品量可以在1〜20 uL的范围内。推荐的样品量为10 uL，DNA浓度在0.2〜100 ng / uL范围内。如果使用其他样品体积，请在浓度计算中调整稀释倍数。
10 uL样品体积（DNA浓度在0.2〜100 ng / uL范围内）实验方案。
1.在每个Cytocite 样品管（＃CCT100）或等效的0.2 mL PCR管中添加190 uL 1X Helixyte Green BR工作溶液。注意：请使用薄壁聚丙烯透明0.2 mL PCR管，例如＃CCT100。
2.向每个试管中加入10 µL DNA标准品或测试样品，然后离心2〜3秒进行混合。
3.将所有试管在室温下孵育2分钟。
4.将样品插入CytoCite 或Quibit 中，并通过绿色荧光通道检测荧光。若使用CytoCite，请遵循适用于CytoCite 荧光仪的程序。
标准校准曲线的准备
对于Portelite 分析，您可以选择使用DNA标准液绘制校正曲线。
1.在DNA分析缓冲液（成分B）中，用100 ng/uL的DNA标准BR#2（成分D）进行1/3系列稀释，得到30、10、3、1、0.3、0.1和0 ng/uL的DNA标准稀释液。
2.在每个试管中加入190 uL Helixyte Green BR工作溶液。
3.将10 uL标准液或10 uL样品添加到0.2 mL PCR管中。
4.将反应在室温下孵育2分钟。
5.将样品插入CytoCite ，并通过绿色荧光通道检测荧光。
图示
图1.使用具有宽动态范围的Portelite 荧光DNA定量试剂盒生成的DNA标准曲线。 使用绿色荧光通道定量荧光强度，使用线性拟合计算回归模型。
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