女人天天干夜夜爽视频 上海蔚霆生物科技有限公司

细胞的培养方法有哪些?

时间:2013-1-14阅读:666
分享:

1,HePG2细胞和L-02细胞的传代:
  
HePG2细胞属人肝肿瘤的恒生细胞株,L-02细胞则是人胎肝细胞株,二者所使用的培养基可以是一样的,即zui常见的DMEM。一般使用低糖的。
  细胞长满培养瓶时既要传代。使用*消化即可。用D-Hank's液或PBS配制成0.25%的*。使用前37度预热,细胞经PBS清洗两遍后,每个中号培养瓶加 0.7ml的*,*的量可根据自己培养瓶的大小而定,原则就是能够盖满瓶底。加入*以后,为使酶的活性zui大,将培养瓶盖拧紧后放回培养箱中,3分钟 左右即用含血清的培养基终止消化。如果在室温情况下消化,时间相应加长,可以在显微镜下观察,当细胞界限已十分清楚,即已分离为单个细胞,且有少量细胞漂 起,则要终止消化了。HepG2细胞株的传代经验:
  首先在倒置显微镜下观察生长融合达 80%,不需要长满,就准备传代。倒掉旧的培养基,再用已经高压灭菌过的PBS洗1-2次,我用的是25平方厘米的培养瓶,加入1毫升已经配制好的 0.25%*-0.02EDTA(0.25%*是用D-Hanks配制后先用滤纸过滤,再用一次性过滤器过滤除菌,再分装成1ml的小包装,刚好 每次用完一个,避免每次反复冻存,会使*的活性下降),加入的量以刚好盖满瓶底为宜。放到倒置显微镜下观察变化,一旦发现细胞开始变圆收缩,大约1-3 分钟时间,必要时可以吹打帮助细胞分散,就立即加入培养基中和*,如有EDTA要离心(800rpm,5min),弃上清夜,再加入*培养基吹 匀,再分瓶,一般一瓶可以分2-3瓶。放入5%的CO2培养箱,37度培养24小时后观察。
 

会员登录

×

请输入账号

请输入密码

=

请输验证码

收藏该商铺

X
该信息已收藏!
标签:
保存成功

(空格分隔,最多3个,单个标签最多10个字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我们将在第一时间回复您~

以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,环保在线对此不承担任何保证责任。

温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。

在线留言