牛牛天天人人综合影院 大鼠抗子宫内膜抗体（AEA）酶联免疫分析试剂盒使用说明书

【资料简介】

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于 -20 ℃保存，但应 避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

4800pg/ml	5号标准品	150 μ l的原倍标准品加入150 μ l标准品稀释液
2400pg/ml	4号标准品	150 μ l的5号标准品加入150 μ l标准品稀释液
1200pg/ml	3号标准品	150 μ l的4号标准品加入150 μ l标准品稀释液
600pg/ml	2号标准品	150 μ l的3号标准品加入150 μ l标准品稀释液
300pg/ml	1号标准品	150 μ l的2号标准品加入150 μ l标准品稀释液

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、 待测样品孔 。在酶标包被板上标准品准确加样50 μ l，待测样品孔中先加样品稀释液40 μ l，然后再加待测样品10 μ l（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁， 轻轻 晃动 混匀 。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟 。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体， 甩干 ，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50 μ l，空白孔除外 。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

8.显色：每孔先加入显色剂A50 μ l，再加入显色剂B50 μ l，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

9.终止：每孔加终止 液50μl，终止反应 （此时蓝色立转黄色） 。

测定：以空白空调零， 4 50 nm波长依序测量各孔的 吸光 度（OD值） 。测定应在加终止液后15分钟以内进行。