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女人天天干夜夜爽视频 人端粒酶(TE)说明书

2011年08月05日 10:09:43人气:2446来源:上海劲马实验设备有限公司

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关 键 词 人端粒酶 (TE)酶联免疫分析, 端粒酶试剂盒,人端粒酶试剂盒
【资料简介】

人端粒酶 (TE) 酶联免疫分析

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围: 96T

1 IU/L -40 IU/L

使用目的:

本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中端粒酶 (TE) 含量。实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人端粒酶 (TE) 水平。用纯化的人端粒酶 (TE) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入端粒酶 (TE) ,再与 HRP 标记的端粒酶 (TE) 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的端粒酶 (TE) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中人端粒酶 (TE) 浓度。试剂盒组成

标本要求

1 .标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于 -20 ℃保存,但应避免反复冻融

2 .不能检测含NaN3的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的( HRP )活性。操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl ,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl

然后再加待测样品 10µl (样品zui终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置 37 ℃温育 3 0 分钟。

4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50µl ,空白孔除外。

7. 温育:操作同 3

8. 洗涤:操作同 5

9. 显色:每孔先加入显色剂 A50µl ,再加入显色剂 B50µl ,轻轻震荡混匀, 37 ℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液 50µl ,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零, 450nm 波长依序测量各孔的吸光度( OD 值)。测定应在加终止

液后 15 分钟以内进行。操作程序总结:

1

30 倍浓缩洗涤液

20ml × 1

7

终止液

6ml × 1

2

酶标试剂

6ml × 1

8

标准品( 80 IU/L

0.5ml × 1

3

酶标包被板

12 孔 × 8

9

标准品稀释液

1.5ml × 1

4

样品稀释液

6ml × 1

10

说明书

1

5

显色剂 A

6ml × 1

11

封板膜

2

6

显色剂 B

6ml × 1/

12

密封袋

1

计算

以标准物的浓度为横坐标, OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项

1 .试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2 .浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3 .各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4 .请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值大于标准品孔*孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数( n 倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5 .封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6 .底物请避光保存。

7 .严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准 .

8 .所有样 品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9 .本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期

1 .试剂盒保存:; 2-8 ℃。

2 .有效期: 6 个月

40 IU/L

5 号标准品

150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液

20 IU/L

4 号标准品

150µl 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

10 IU/L

3 号标准品

150µl 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

5 IU/L

2 号标准品

150µl 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

2.5 IU/L

1 号标准品

150µl 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

上海劲马实验设备有限公司作者

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