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女人天天干夜夜爽视频 *(Polymyxin-B)说明书

2011年09月07日 10:17:13人气:607来源:上海恒远生物科技有限公司

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关 键 词 *,说明书
【资料简介】

  1
*(Polymyxin-B)酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
1 使用目的:
本试剂盒用于肉类组织(如鸡、牛肉和猪肉)中多粘菌素 B(Polymyxin-B)残留的定
量检测。
2 实验原理
本试剂盒采用竞争ELISA 方法,在微孔板包被有*(Polymyxin-B)偶联抗原,
加入*(Polymyxin-B)标准品或样品,游离*(Polymyxin-B)与微孔条
上预包被的*(Polymyxin-B)偶联抗原互相竞争抗*(Polymyxin-B)抗
体酶标记物,用TMB 底物显色,加入终止液后颜色由蓝色变为黄色,用酶标仪在450nm波
长下进行检测,吸光值与样品中多粘菌素 B(Polymyxin-B)含量成反比,通过标准曲线计
算样品中*(Polymyxin-B)的含量。
3 试剂盒组成
3.1  预包被的*(Polymyxin-B)偶联抗原的可拆酶标板:1块(12 孔×8条)。
3.2 * (Polymyxin-B) 标准品: 6瓶 (1ml/瓶), 含量分别是:   0 ppb, 0.1 ppb,0.3 ppb,0.9
ppb,2.7 ppb,8.1 ppb。
3.3 抗*(Polymyxin-B)抗体酶结合物:1瓶(6ml)。
3.4 显色液A:1瓶(6ml)。
3.5 显色液B:1 瓶(6ml)。
3.6 终止液:1瓶(6ml),2M硫酸。
3.7 *:1瓶(10×,    6ml),用于样品稀释用。
3.8 浓缩洗涤液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。
3.9 说明书一份。
4 需要而未提供的材料
4.1  设备
4.1.1波长450nm酶标仪。
4.1.2粉碎机。
4.1.3量筒。
4.1.4振荡器。
4.1.5漏斗。
4.1.6Whatman 或相当的滤纸。
4.1.7微量移液器。
4.2  试剂
4.2.1去离子水或蒸馏水。
4.2.2 甲醇。
5 贮存
5.1  试剂盒贮存于2~8℃,切勿冷冻
5.2  未用完的微孔板应该密封干燥保存
6 注意事项   2
6.1  使用试剂盒前请仔细阅读说明书。
6.2  不要使用过期试剂盒。
6.3  试剂盒使用前,将试剂恢复至室温(25±2℃),建议至少回温2小时。
6.4  标准品中含有*(Polymyxin-B) ,使用时应特别注意,操作时应带手套。
6.5  终止液中含有硫酸,使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。
6.6  不同标准品、样品所用吸头不能混用,否则会影响试验结果。
6.7  不同批号试剂盒中的试剂不得混用;不同标准品、样品所用吸头不得混用,否则会影响
实验结果。
6.8  稀释样本时必须用本试剂盒中的*,否则会影响实验结果
6.9  混合试剂时应避免起泡。
7 工作液准备
7.1  *(Polymyxin-B)标准品溶液:0ppb,0.1ppb,0.3 ppb,0.9ppb,2.7 ppb,8.1ppb
7.2  浓缩洗涤液:用蒸馏水按1:20(1+19)稀释备用
7.3  *:用蒸馏水按1:10(1+9)稀释备用
7.3  显色剂:已备用,避免光线直照
7.4  反应终止液:已备用
8 样品处理程序(样品在提取过程中,要严格按说明书操作,提取过程中应准确稀释,否则
会出现结果不准确,样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存)
8.1取10g粉碎的样品,加  20ml 70%甲醇溶液
8.2强力振荡3分钟
8.3用Whatman 滤纸过滤
8.4取100µl处理后的样品,加入400µl*
8.5取25µl处理后的样品,加入25µl*于反应孔中(样本稀释倍数为2)
9 酶免分析步骤
9.1  实验须知
9.1.1 实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温(25±2℃),时间约2小时。回温至室
温(25±2℃)后再取出微孔条,多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存
注:一定保证回温充分,否则影响检测的度和准确度。
9.1.2 使用后请立即将试剂放回2~8℃保存
9.1.3 请不要改变分析程序
9.1.4 请使用的微量移液器
9.1.5 操作一旦开始,请不要中断任何程序
9.1.6 ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序,请严格按照要求操作
9.1.7 为避免交叉污染,每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样
9.1.8 加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面
9.2  分析步骤
9.2.1 预*行编号,标记B0、标准品和样品的位置,推荐进行双孔检测
9.2.2 取所需数量的微孔(微孔条可拆),将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存
9.2.3 样品稀释液(10×)、浓缩洗涤液(20×)稀释成工作液(蒸馏水或去离子水稀释)
9.2.4 在B0孔中加入50µl0.0 ng/ ml标准品溶液
9.2.5 在各标准孔中加入50µl的标准品溶液
9.2.6 在各样品孔中加入50µl样品溶液
9.2.7 在所有孔中加入50µl的抗*(Polymyxin-B)抗体酶结合物
9.2.8 轻轻晃动反应板几秒钟。     3
9.3 37℃温浴30min (温浴过程中不时轻拍反应板,可以减少双孔误差)
9.3.1 甩掉孔中液体,用洗液洗涤微孔板5次,zui后一次应在吸水纸上拍打以*除去孔中液
体。
9.4  反应
9.4.1  洗涤程序完成后,立即用微量移液器在每个微孔中先加入50µl显色液A,再加  50µl显
色液B;轻微晃动反应板使之*混匀
9.4.2 37℃温浴10min
9.4.3 每孔中加入50µl终止液,混匀
9.4.4 在450nm下检测吸光度,结果在5min内读取。
10 结果计算
10.1定量分析
10.1.1所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值(B)除以*个标准(0标准)
的吸光度值(B0)再乘以100%,即百分吸光度值。
B—标准溶液或样本溶液的平均吸光度值
B0—0µg/L标准溶液的平均吸光度值
10.1.2以*(Polymyxin-B)浓度的对数值为X轴,百分吸光度值为Y轴,绘制标准曲
线图。根据样品百分吸光度值,可从曲线上得到对应点的横坐标,即为*
(Polymyxin-B)浓度的对数值,求得反对数即为测定液中*(Polymyxin-B)浓度
C(ppb)
10.1.3由于样品经过了预先稀释,因此根据标准曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释
倍数。
10.2 半定量测定
10.1.1目测半定量测定:首先选择一个适当的标准液与样品同运行,根据样品与标准品吸光
度值的高低比较,判断样品浓度值是小于还是大于标准值。
10.1.2仪器半定量测定:首先选择一个适当的标准液与样品同运行,根据样品与标准品颜色
深浅比较,判断样品浓度值是小于还是大于标准值。
11 特异性
物质 交叉反应
*(Polymyxin-B)……. 100%
多粘菌素A…………………..        <0.3%
多粘菌素C…………………..       <0.1%
多粘菌素D…………………..        <0.2%
*…………………..       <0.1%

12 试剂盒参数
本试剂盒检测下限为0.05ppb
B0吸光度*值应大于1.0
试剂盒吸光度板内误差小于8%,板间误差小于15%。
用本说明书提供的组织样本提取方法回收率大于80%。
13 标准曲线模式(仅供参考)
试 剂 盒 提 供 的 标 准 曲 线 范 围 为 0.1ppb~8.1ppb 。  4


14 分析限制
本试剂盒检测为阳性的样品应该用另一种方法如HPLC或GC/MS加以确证。

上海恒远生物科技有限公司作者

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