男女呻吟久久免费视频 植物铁氧还蛋白（FDX）酶联免疫试剂盒的实验原理

【资料简介】

植物铁氧还蛋白（ FDX ）酶联免疫试剂盒 说明书

本试剂盒仅供研究使用。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物铁氧还蛋白（ FDX ）水平。用纯化的植物铁氧还蛋白（ FDX ）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入植物铁氧还蛋白（ FDX ），再与 HRP 标记的铁氧还蛋白（ FDX ）抗体结合，形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的植物铁氧还蛋白（ FDX ）呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（ OD 值），通过标准曲线计算样品中植物铁氧还蛋白（ FDX ）浓度。

组成

30 倍浓缩洗涤液 20ml × 瓶 7 终止液 6ml × 瓶

2 酶标试剂 6ml × 瓶 8 标准品（ 20ng/L ） 0.5ml × 瓶

3 酶标包被板 2 孔× 8 条 9 标准品稀释液 .5ml × 瓶

4 样品稀释液 6ml × 瓶 0 说明书 份

5 显色剂 A 液 6ml × 瓶 封板膜 2 张

6 显色剂 B 液 6ml × / 瓶 2 密封袋 个

标本要求

．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于 -20 ℃保存，但应避免反复冻融

2 ．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（ HRP ）活性。

操作步骤

. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

60ng/L5 号标准品 50 μ l 的原倍标准品加入 50 μ l 标准品稀释液

30ng/L4 号标准品 50 μ l 的 5 号标准品加入 50 μ l 标准品稀释液

5ng/L3 号标准品 50 μ l 的 4 号标准品加入 50 μ l 标准品稀释液

7.5ng/L2 号标准品 50 μ l 的 3 号标准品加入 50 μ l 标准品稀释液

3.75ng/L 号标准品 50 μ l 的 2 号标准品加入 50 μ l 标准品稀释液

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50 μ l ，待测样品孔中先加样品稀释液 40 μ l ，然后再加待测样品 0 μ l （样品*终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置 37 ℃温育 30 分钟。

4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50 μ l ，空白孔除外。

7. 温育：操作同 3 。

8. 洗涤：操作同 5 。

9. 显色：每孔先加入显色剂 A50 μ l ，再加入显色剂 B50 μ l ，轻轻震荡混匀， 37 ℃避光显色 0 分钟 .

0. 终止：每孔加终止液 50 μ l ，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

. 测定：以空白空调零， 450nm 波长依序测量各孔的吸光度（ OD 值）。测定应在加终止液后 5 分钟以内进行。

植物铁氧还蛋白（ FDX ）酶联免疫试剂盒 注意事项

．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 5-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2 ．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3 ．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在 5 分钟内，如标本数量多，使用排枪加样。

4 ．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值大于标准品孔孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（ n 倍）后再测定，计算时请*后乘以总稀释倍数（× n × 5 ）。

5 ．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6 ．底物请避光保存。

7 ．严格按照的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准 .

8 ．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9 ．本试剂不同批号组分不得混用。

植物铁氧还蛋白（ FDX ）酶联免疫试剂盒 保存条件及有效期

．试剂盒保存： 2-8 ℃。

2 ．有效期： 6 个月