男女呻吟久久免费视频 游离脂肪酸（FFA）含量测定试剂盒

【资料简介】

测定意义：

FFA 既是脂肪水解的产物，又是脂肪合成的底物。血清中 FFA 的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关。

测定原理：

FFA 与铜离子结合形成脂肪酸铜盐，并溶于氯坊；利用铜试剂法测定铜离子含量，即可推算出游离脂肪酸含量。

自备仪器和用品：

研钵、冰、台式离心机、可调式移液枪、可见分光光度计 / 酶标仪、微量石英比色皿 /96 孔板、一个 25 mL 玻璃瓶、两个 10 mL 玻璃瓶、正庚烷、无水甲醇、氯坊（三氯钾烷）、无水乙醇和蒸馏水。

试剂组成和配制：

试剂一：液体 ×1 瓶，室温保存。

试剂二：自备。实验前 1 d ，加入 4.8 mL 正庚烷， 0.2 mL 无水甲醇， 5 mL 氯坊（自备），盖紧后混匀，室温保存。

试剂三：液体 ×1 瓶，室温保存。

试剂四：粉剂 ×1 瓶， 4 ℃ 保存。临用前在试剂瓶中加入 4 mL 无水乙醇，充分溶解。

标准品：粉剂 ×1 瓶，室温保存。临用前加入 7.8 mL 氯坊充分溶解，即为 500μmol/L 的棕榈酸标准溶液。

样品中 FFA 提取：

1 、血液中 FFA 测定： 将所取血液，室温静置 1 h 后，于 4 ℃ 离心机 3 500 rpm 离心 15min ，取上层血清置于 -20 ℃ 冰箱保存，待测

2 、组织中 FFA 含量测定： 组织用生理盐水冲洗干净后，用吸水纸吸取表面水分，称取约 0.1g ，加入 1 mL 试剂一，匀浆后， 8000rpm ， 4 ℃ 离心 10min ，取上清液，稀释 5 倍，待测。

测定：

1. 分光光度计预热 30 min 以上，调节波长到 550 nm ，蒸馏水调零。

2. 空白管： 取 0.5mL EP 管，加入 10μL 蒸馏水， 100μL 试剂二， 40μL 试剂三， 40μL 试剂四，盖紧后充分震荡混匀（ 2min ），倒入微量石英比色皿 /96 孔板，静置 15min ，于 550nm 光吸收，记为 A 空白管。

3. 标准管： 取 0.5mL EP 管，加入 10μL 标准液， 100μL 试剂二， 40μL 试剂三， 40μL 试剂四，盖紧后充分震荡混匀（ 2min ），倒入微量石英比色皿 /96 孔板，静置 15min ，于 550nm 光吸收，记为 A 标准管。

4. 测定管： 取 0.5mL EP 管，加入 10μL 上清液， 100μL 试剂二， 40μL 试剂三， 40μL 试剂四，盖紧后充分震荡混匀（ 2min ），倒入微量石英比色皿 /96 孔板，静置 15min ，于 550nm 光吸收，记为 A 测定管。

FFA 含量计算：

a. 使用微量石英比色皿测定的计算公式如下

1 、血液 FFA 含量

FFA 含量（ μ mol/L ） =[C 标准液 ×(A 测定管－ A 空白管 )÷(A 标准管－ A 空白管 )] 1 L×5

=2500×(A 测定管－ A 空白管 )÷(A 标准管－ A 空白管 )

2 、组织 FFA 含量

（ 1 ）按样本蛋白浓度计算

FFA 含量（ μ mol/g 鲜重） =[C 标准液 ×(A 测定管－ A 空白管 )÷(A 标准管－ A 空白管 )]×V 样总 ÷ Cpr ×5=2.5×(A 测定管－ A 空白管 )÷(A 标准管－ A 空白管 ) ÷ Cpr

（ 2 ）按样本鲜重计算

FFA 含量（ μ mol/g 鲜重） =[C 标准液 ×(A 测定管－ A 空白管 )÷(A 标准管－ A 空白管 )]×V 样总 ÷W×5=2.5×(A 测定管－ A 空白管 )÷(A 标准管－ A 空白管 ) ÷W

C 标准液： 500μmol/L ； 1 L ：指每升样品； V 样总：上清液总体积， 1 mL=0.001L ； Cpr ：样本蛋白质浓度， mg/mL ； W ：样品质量， g 。

b. 使用 96 孔板测定的计算公式如下

1 、血液 FFA 含量

FFA 含量（ μ mol/L ） =[C 标准液 ×(A 测定管－ A 空白管 )÷(A 标准管－ A 空白管 )]×1 L×5=2500×(A 测定管－ A 空白管 )÷(A 标准管－ A 空白管 )

2 、组织 FFA 含量

（ 1 ）按样本蛋白浓度计算

FFA 含量（ μ mol/g 鲜重） =[C 标准液 ×(A 测定管－ A 空白管 )÷(A 标准管－ A 空白管 )]×V 样总 ÷ Cpr ×5 =2.5×(A 测定管－ A 空白管 )÷(A 标准管－ A 空白管 ) ÷ Cpr

（ 2 ）按样本鲜重计算

FFA 含量（ μ mol/g 鲜重） =[C 标准液 ×(A 测定管－ A 空白管 )÷(A 标准管－ A 空白管 )]×V 样总 ÷W×5=2.5×(A 测定管－ A 空白管 )÷(A 标准管－ A 空白管 ) ÷W

C 标准液： 500μmol/L ； 1 L ：指每升样品； V 样总：上清液总体积， 1 mL=0.001L ； Cpr ：样本蛋白质浓度， mg/mL ； W ：样品质量， g 。

注意事项：

1. 试剂四配制应尽量晚配，可在操作到加入试剂三时，再配制试剂四。

2. 该试剂盒不可用塑料比色皿和 96 孔板测定，需用玻璃比色皿。