女人天天干夜夜爽视频 牛肿瘤坏死因子α（TNF-α）酶联免疫分析试剂盒使用注意事项

【资料简介】

   女人天天干夜夜爽视频 牛肿瘤坏死因子α（TNF-α）酶联免疫分析试剂盒使用注意事项

检测范围： 96T

8ng/L - 240ng/L

使用目的：

本试剂盒用于测定牛血清、血浆及相关液体样本中 兔肿瘤坏死因子α（ TNF α） 含量 。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛肿瘤坏死因子α（ TNF α） 水平。用纯化的牛肿瘤坏死因子α（ TNF α） 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α（ TNF α）， 再与 HRP 标记的肿瘤坏死因子α（ TNF α） 抗体结合，形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α（ TNF α） 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（ OD 值），通过标准曲线计算样品中牛肿瘤坏死因子α（ TNF α） 浓度。

试剂盒组成

1	30 倍浓缩洗涤液	20ml × 1 瓶	7	终止液	6ml × 1 瓶
2	酶标试剂	6ml × 1 瓶	8	标准品（ 480 ng/L ）	0.5ml × 1 瓶
3	酶标包被板	12 孔× 8 条	9	标准品稀释液	1.5ml × 1 瓶
4	样品稀释液	6ml × 1 瓶	10	说明书	1 份
5	显色剂 A 液	6ml × 1 瓶	11	封板膜	2 张
6	显色剂 B 液	6ml × 1/ 瓶	12	密封袋	1 个

标本要求

1 ．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可 将标本放于 -20 ℃ 保存，但 应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品 ，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（ HRP ）活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

240ng/L	5 号标准品	150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液
120ng/L	4 号标准品	150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
60ng/L	3 号标准品	150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
30ng/L	2 号标准品	150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
15ng/L	1 号标准品	150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50 μl ， 待测样品孔中先加样品稀释液 40 μ l ，然后再加待测样品 10 μ l （样品zui终稀释度为 5 倍）。 加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置 37 ℃ 温育3 0 分钟。

4. 配液：将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 20 倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50μl ，空白孔除外。

7. 温育：操作同 3 。

8. 洗涤：操作同 5 。

9. 显色：每孔先加入显色剂 A50μl ，再加入显色剂 B50μl ，轻轻震荡混匀， 37 ℃ 避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液 50μl ，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零， 450nm 波长依序测量各孔的吸光度（ OD 值）。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

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