凝集素的应用

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        一般认为细胞膜上特定的糖基可用以区别细胞的类型和反映细胞在分化、成熟和肿瘤细胞性变中的变化。仅在某些特殊的例子，其细胞结合凝集素的性能可以预先估计，如双花扁豆素之于血型A 物质的特异性，荆豆凝集素之于血型 O 物质 2—L— 岩藻糖的特异性，然而在绝大多数情况下，关于由凝集素所识别的碳水化合物决定簇的种类，关于携带决定簇的分子的性质和机能，*凭实验经验去发现。

1 ．作为细胞分化和成熟的标记，应用凝集素作为细胞分化的标志，在这方面的应用报告zui多，而且研究比较集中于血细胞，特别是淋巴细胞的分群。如 Rose （ 1980 ）等发现在小鼠胸腺皮质内不成熟的 T 淋巴细胞呈 PNA 阳性反应，在小鼠小肠集合淋巴小结的生发中心也发现有 20% 左右的 PNA 阳性反应细胞，后者是否属于不成熟的 T淋巴细胞 ，是值得进一步研究的问题。 Newman 等（ 1979 ）以荧光素标记凝集素 PNA ，发现在大鼠乳腺上皮的不同分化时期显示不同的荧光强度。在不成熟的大鼠乳腺上皮细胞，荧光弱或无，随着性成熟期到妊娠期乳腺上皮荧光程度逐渐加强，而泌乳期荧光强度达zui高峰。在皮肤角质细胞自基底向表层分化、成熟的过程中，细胞表面的碳水化合物的分布和性质都在改变。 Brabed 等（ 1981 ）应用新生大鼠皮肤的实验表明，皮肤各层细胞分别与不同的凝集素相结合。麦芽素与角质化细胞相结合，蓖麻素与棘细胞和基底细胞相结合，而荆豆凝集素标记在棘细胞的表面。在成肌细胞（ myeoblast ）的分化 与成熟过程中， Winaod 和 Luzzati （ 1975 ）注意到类似的皮肤的改变。

2 ．作为细胞特殊类型的标记 Kivela 和 Farkkanen （ 1987 ）发现在人视网膜， PNA 标记视锥细胞而不标记视杆细胞。在乳腺、乳腺上皮细胞呈 PNA 阳性反应而肌上皮细胞和间质细胞呈 PNA 阴性反应。以多种凝集素对小鼠、大鼠和兔的肾组织切片进行染色结果表明，刀豆素 A 和蓖麻素存在于肾脏的各部， PNA 和双花扁豆凝集素（ DBA ）主要分布于远曲小管和集合小管上皮细胞，荆豆凝集素（ UEA ）主要分布在血管内皮细胞，而麦芽素分布在肾小球。应用 DBA 对 RIII 和 DDK 品种的小鼠研究表明， DBA 主要结合在各种组织内毛细血管内皮细胞上，电镜观察显示 DBA 结合在内皮细胞的表面，在趣的是在 RIII 品系小鼠某些组织的内皮细胞显示肯定的 DBA 阴性反应，说明同一种属动物的血管内皮细胞也存在有组织特异性的差别。 Streit 和 Kreutzberg （ 1987 ）发现 Griffonia Simplicifolia 凝集素特异性标记面神经节　内的小胶质细胞，其它类型的胶质细胞如星状胶质细胞（ astrocyte ）等都显示阴性反应。在切断面神经后，增殖的小胶质细胞对 Griffonia Simplicifolia 凝集素的反应加强，免疫电镜观察表明，凝集素主要沉积在细胞膜或小胶质细胞突起的轴膜表面，特异性结合糖基是 α—D— 半乳糖。上海医科大学附属肿瘤医院免疫病理室应用 12 种凝集素（表 6-1 ）对人胚胎及各种正常组织进行了系统的凝集素受体的定位研究，结果表明，凝集素受体的分布并无即定规律可寻。如胃粘膜主细胞为 PNA 受体，而壁细胞为 BSL 受体，双花扁豆受体（ DBA ）主要出现在大肠部份。

3． 在肿瘤中凝集素结合的改变 　肿瘤细胞伴有细胞膜的改变，细胞膜上的糖基也会产生相应的变化，可用凝集素检测出来。大量研究发现，凝集素可作为肿瘤组织源性的标记、肿瘤特异性诊断的标志、肿瘤恶性的标记和不同肿瘤的分化标记。如张华忠等（1987 ）报道 115 例胃癌标记 PHA 阳性率高达 90.43% ，而正常胃粘膜基本是阴性，故认为 PHA 是胃癌的诊断性标志。 BSA 对乳腺恶性肿瘤阳性率达 79% ，而对良性病变均呈阴性反应，提示 BSA 可能为乳腺恶性肿瘤的相关标志。凝集素还有助于判别肿瘤的组织类型，如神经系统星形细胞瘤 ConA 阳性，小胶质细胞瘤阴性，肾腺癌 UEA1 阴性，透明细胞癌阳性。